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病理論壇在線咨詢無醛、無苯、無汞—GS環(huán)保型病理制片套液的應(yīng)用體會
無醛、無苯、無汞—GS環(huán)保型病理制片套液的應(yīng)用體會
吳克非
哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院病理科
目前，國內(nèi)外一直普遍應(yīng)用的甲醛固定、梯度乙醇脫水、二甲苯透明和脫蠟的傳統(tǒng)病理制片技術(shù)已誕生的150多年，雖能達(dá)到臨床診斷目的，但這種方法在制片過程中大量使用甲醛、二甲苯、氧化汞等有毒有害化學(xué)試劑。而甲醛、二甲苯對人體造血系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)等有較強(qiáng)的損害作用，有致癌性，是引發(fā)病理專業(yè)人員職業(yè)性苯中毒的主要試劑。使用后廢棄的試劑，又對環(huán)境造成嚴(yán)重危害，替代甲醛、二甲苯試劑是病理操作人員多年以來的夢想。
針對上述情況，哈爾濱格林標(biāo)本技術(shù)開發(fā)有限公司的多位病理專家經(jīng)過多年的研究探索，終于開發(fā)出了******首創(chuàng)的全新病理技術(shù)平臺—GS無醛、無苯、無汞環(huán)保型組織標(biāo)本制備及切片染色技術(shù)。我院自2010年初使用至今，已應(yīng)用10000余例人體組織樣本制片，現(xiàn)將使用體會總結(jié)如下：
1. 材料和方法
1.1 材料
手術(shù)室送檢的脂肪、淋巴結(jié)、乳腺、皮膚、肝臟等人體組織。
1.2 方法
組織樣本取材體積在1.5×1.5×0.3cm3范圍內(nèi)，肌肉組織面積適中、厚薄均勻；淋巴組織剖開后再固定；骨組織須先固定再脫鈣。而后采用GS 無醛、無苯標(biāo)本制備套液在全自動全封閉脫水機(jī)進(jìn)行組織處理，同時利用GS無苯工作槽清洗液對脫水機(jī)工作槽進(jìn)行清洗；再經(jīng)過GS無苯、無汞切片染色套液進(jìn)行切片染色，***后采用GS無苯封片膠進(jìn)行封片。
1、無醛組織固定液
2、組織脫水液Ⅰ
3、組織脫水液Ⅱ
4、無苯組織透明液
5、組織浸蠟液Ⅰ
6、組織浸蠟液Ⅱ
全自動全封閉組織脫水機(jī)操作程序
|
工作缸 |
試劑名稱 |
工作時間 |
合計時間 |
|
1號 |
無醛組織固定液 |
1小時 |
4小時 |
|
2號 |
無醛組織固定液 |
3小時 |
|
|
3號 |
75%乙醇 |
5分鐘 |
10分鐘 |
|
4號 |
75%乙醇 |
5分鐘 |
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|
5號 |
組織脫水液I |
30分鐘 |
1.5小時 |
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6號 |
組織脫水液I |
1小時 |
|
|
7號 |
組織脫水液II |
30分鐘 |
1.5小時 |
|
8號 |
組織脫水液II |
1小時 |
|
|
9號 |
無苯組織透明液 |
1小時 |
3小時 |
|
10號 |
無苯組織透明液 |
2小時 |
|
|
蠟缸1號 |
組織浸蠟液I |
3小時 |
3小時 |
|
蠟缸2號 |
組織浸蠟液II |
2小時 |
3小時 |
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蠟缸3號 |
組織浸蠟液II |
1小時 |
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11號 |
無苯工作槽清洗液I |
自動標(biāo)準(zhǔn)清洗程序 |
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12號 |
無苯工作槽清洗液II |
自動標(biāo)準(zhǔn)清洗程序 |
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13號 |
無水乙醇或純凈水 |
自動標(biāo)準(zhǔn)清洗程序 |
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14號 |
廢液收集 |
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1、無苯切片脫蠟液I 
2、無苯切片脫蠟液Ⅱ
3、無汞蘇木素染色液
4、伊紅染色液
5、除浮染液
6、除水透明液
7、切片透明液
常規(guī)石蠟組織切片HE染色程序
-
|
序號 |
1 |
→ |
2 |
→ |
→ |
3 |
→ |
|
步驟 |
脫蠟液Ⅰ |
脫蠟液Ⅰ |
脫蠟液Ⅱ |
95%乙醇 |
自來水 緩流清洗 |
蘇木素 染色液 |
自來水 緩流清洗 |
|
用時 |
5～10min |
5～10min |
2～3min |
10～20s |
2min |
3～5min |
10s |
|
序號 |
|
→ |
|
→ |
4 |
→ |
|
步驟 |
分化液 |
自來水 緩流清洗 |
藍(lán)花液 |
自來水 緩流清洗 |
伊紅 染色液 |
自來水 緩流清洗 |
|
用時 |
2～3min |
1～2s |
5～10s |
1～2min |
30～60s |
1～2s |
|
序號 |
5 |
→ |
→ |
6 |
→ |
7 |
→ |
|
步驟 |
除浮 染液 |
無水乙醇 |
瀝干 |
除水 透明液 |
瀝干 |
透明液 |
潮干 封片 |
|
用時 |
3s |
1min |
|
1min |
|
2min |
|
2. 結(jié)果
使用GS環(huán)保型病理制片套液，結(jié)果符合臨床病理診斷要求。制片步驟由傳統(tǒng)的三十幾個步驟縮短至十三個步驟，并且效果穩(wěn)定。處理后的組織固定好、脫水徹底、蠟塊軟硬適中；組織切片核漿對比清晰；同時對于硬組織（如子宮組織、皮膚組織等）能夠大幅度節(jié)約切片機(jī)刀片。
GS環(huán)保型病理制片套液適用于常規(guī)組織樣本制備及切片染色、術(shù)中冷凍切片染色、脫落細(xì)胞染色、免疫組織化學(xué)染色以及分子生物學(xué)（圖1，2，3，4）。
HE×10 HE×4
3. 討論
隨著國家對節(jié)能減排的要求越來越高，甲醛、二甲苯等有毒害產(chǎn)品被強(qiáng)制性回收，ＧＳ無醛、無苯、無汞――環(huán)保型病理試劑每年可減少近千萬噸的甲醛、二甲苯等有毒害氣體排放，所產(chǎn)生間接的經(jīng)濟(jì)效益和社會效益無法估量。
哈爾濱格林標(biāo)本技術(shù)開發(fā)有限公司自主研發(fā)的ＧＳ環(huán)保型病理制片套液效果符合制片要求，不影響病理診斷，完全可以替代百年來使用的傳統(tǒng)甲醛、二甲苯制片方法。在保證制片質(zhì)量的同時，確保了病理工作者的健康，有利于環(huán)境保護(hù)。希望格林公司能繼續(xù)研發(fā)出病理相關(guān)的其他環(huán)保產(chǎn)品，也希望廣大同行能共同參與到此項(xiàng)利國利民利已的工作當(dāng)中。
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